Am 22. November 1963 schoss der mutmaßliche Mörder Lee Harvey Oswald von diesem Stockwerk des früheren Texas School Book Depository auf den Präsidenten John F. Kennedy. Heute ist die 836 qm große Etage Kennedys Leben, Karriere und Tod gewidmet. Trotz der bedrückten, andächtigen Stimmung stellt die Ausstellung den 35. Präsidenten in Hör- und Lesetexten, Archivfotografien, Filmausschnitten und einem Video nicht verklärt, sondern als historische Figur dar. Nach einer Einführung über Familiengeschichte, Hochzeit und anfängliche Karriere legt die Ausstellung den Schwerpunkt auf die Wahlkampagne im Jahr 1960 und die 1.000 Tage der Kennedy-Präsidentschaft mit besonderem Augenmerk auf den Ereignissen vor dem Attentat. Das Fenster an der südöstlichen Ecke, von dem aus Oswald angeblich auf den Präsidenten schoss, wurde mit als Versteck aufgestapelten Kartons wieder wie zum Mordzeitpunkt gestaltet. Im letzten Teil werden Verschwörungstheorien und mögliche Mordmotive diskutiert. Mehrere Vitrinen sind der internationalen Reaktion auf den Mord gewidmet, und auch Besucher können ihre Gedanken niederschreiben. Das Museum liegt im nationalen Wahrzeichen Dealey Plaza dem Bereich, in dem der Mord an Kennedy und die nachfolgende Ereignisse stattfanden.